• iTRAQ蛋白组定量分析技术_科技频道_东方资讯

  • 发布日期:2020-08-19 01:26   来源:未知   阅读:

相对和绝对定量同位素标记(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)技术蛋白组定量分析技术相信很多蛋白组学方面研究的同学们都接触过。iTRAQ技术是美国应用生物系统(AB SCIEX)公司于2004年推出的一种全新的体外同重同位素标记的相对与绝对蛋白组定量技术。

iTRAQ蛋白组定量技术可实现对多种不同样品中蛋白的比较,具有重现性好、灵敏度高、定性与定量可同时进行的优势,已越来越多的被运用到蛋白组学研究中。iTRAQ技术可检测到的蛋白除了胞浆蛋白外,还有线粒体蛋白、膜蛋白和核蛋白。也能对任何类型的蛋白质进行鉴定,包括高分子量,酸性,碱性蛋白质。

iTRAQ蛋白组定量分析标签包括三部分:

1. 报告基团(reporter group):指示蛋白样品丰度水平。

2. 平衡基团(balance group):平衡报告基团的质量差,使等重标签重量一致,保证标记的同一肽段m/z相同。

3. 肽反应基团(amine-specific reactive group):能与肽段N端及赖氨酸侧链氨基发生共价连接,从而标记上肽段。

itraq标签

iTRAQ蛋白组定量分析的技术优势

l 高通量:一次最多可以实现8个样品的定性定量分析,特别适用于采用多种处理方式或来自多个处理时间的样本的差异蛋白分析。

l 结果可靠:基于高度敏感性和精确性的串联质谱方法,定性与定量同步进行,同时得出鉴定和定量结果,重复样品间的蛋白表达量相关性高。

l 灵敏度高:分级分离,降低样品复杂度,相比凝胶电泳观测到的蛋白变化在2倍以上,iTRAQ计算出的蛋白变化在1.3-1.6倍之间,可检测低丰度蛋白。

l 高效:定性定量同步进行,且有较高重复性。

l 自动化程度高:液质连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。

iTRAQ蛋白组定量分析常见应用领域

iTRAQ蛋白组定量分析技术已被广泛地应用于植物、微生物、动物、环境等多种样本的蛋白质鉴定和定量。在医学研究领域也有成功应有,如分析鉴定出肿瘤组织的差异性蛋白,从而寻找样品对组织癌变的标志物进行筛选;也可用于筛选与药物作用的差异性蛋白,进而研究药物作用的靶点和机制。iTRAQ技术还可以为我们研究疾病的发生、进展机制,发现新的生物学标记物提供有力的技术平台,与蛋白组学完美结合,在医学,农业,工业得到更大发展。